กระบวนการสกัดแอนโทไซยานินจากดอกอัญชันเป็นก้าวสำคัญในการปลดล็อกศักยภาพสำหรับการใช้งานทางอุตสาหกรรม เอกสารนี้ให้การอภิปรายเชิงลึก-เกี่ยวกับวิธีการสกัดแอนโทไซยานิน ปัจจัยที่ส่งผลต่อประสิทธิภาพการสกัด กลยุทธ์การปรับให้เหมาะสม และการประยุกต์ใช้เม็ดสีที่สกัดได้ในทางปฏิบัติ แต่จะสกัดสารแอนโทไซยานินจากดอกอัญชันได้อย่างไร?

อะไรคือองค์ประกอบทางเคมีของแอนโทไซยานินในดอกอัญชัน?
ผงดอกอัญชันมีเอกลักษณ์เฉพาะตรงที่เม็ดสีของมันมีสารเทอร์นาติน ซึ่งเป็นอนุพันธ์ของแอนโทไซยานินที่มีเดลฟีนิดิน{0}}เป็นหลัก โมเลกุลเหล่านี้มักถูกเอซิเลตด้วยหมู่อะโรมาติกเอซิล เช่น พี-คูมาโรอิล, คาเฟโออิล และเฟรูโลอิล มอยอิตี การเกิดอะซิเลชันช่วยให้เม็ดสีคงตัว จึงสามารถต้านทานการย่อยสลายภายใต้ความร้อนหรือแสงได้
• แอนโทไซยานินหลัก: อนุพันธ์เดลฟีนิดิน-3,3′,5′-ไตรกลูโคไซด์
• เทอร์นาติน: สารโพลีเอไซเลทแอนโทไซยานินที่ทำให้ดอกไม้มีสีฟ้าเข้ม
• มีฟลาโวนอยด์อื่นๆ: Kaempferol และ quercetin glycosides
ความไวต่อ pH ของแอนโทไซยานินของอัญชันช่วยให้พวกมันแสดงการเปลี่ยนสีได้ ทำให้พวกมันเป็นที่นิยมสำหรับชาฟังก์ชั่นและสีผสมอาหารตามธรรมชาติ ที่ pH ที่เป็นกรด เม็ดสีจะเปลี่ยนสีม่วงเป็นสีชมพู ที่ pH เป็นกลางหรือเป็นด่าง จะแสดงเฉดสีน้ำเงินถึงเขียว
การสกัดเป็นกระบวนการถ่ายโอนมวลโดยพื้นฐานแล้วตัวถูกละลาย (แอนโทไซยานิน) กระจายจากสถานะของแข็ง (เนื้อเยื่อดอกไม้) ไปเป็นตัวทำละลาย ประสิทธิภาพของกระบวนการนี้ขึ้นอยู่กับการทำลายผนังเซลล์ของพืชเพื่อปล่อยสารภายในเซลล์ออกมา หลักการสำคัญมีดังต่อไปนี้
• ความสามารถในการละลาย:
แอนโทไซยานินเป็นโมเลกุลที่มีขั้วดังนั้นจึงละลายได้สูงในตัวทำละลายที่มีขั้ว เช่น น้ำ เมทานอล เอทานอล และอะซิโตน
• การแพร่กระจาย:
อัตราที่ตัวทำละลายแทรกซึมเข้าไปในวัสดุพืชและแอนโทไซยานินที่ละลายจะกระจายออกไป
• การหยุดชะงักของเซลล์:
เทคนิคที่ทำลายผนังเซลล์ที่แข็งตัว (เช่น การบด การทำความร้อน อัลตราซาวนด์) ช่วยเพิ่มการปล่อยสารประกอบ
• ตัวทำละลายชิค
การเลือกใช้ตัวทำละลายเป็นสิ่งสำคัญยิ่ง จะต้องมีประสิทธิภาพ ปลอดภัยสำหรับการใช้งานที่ต้องการ (โดยเฉพาะอาหารและยา) และประหยัด

วิธีการสกัดสารแอนโทไซยานินจากดอกอัญชัน?
ต่อไปนี้เป็นเกณฑ์วิธีมาตรฐานโดยใช้วิธีการที่ง่ายและมีประสิทธิภาพซึ่งสามารถทำซ้ำได้ในห้องปฏิบัติการ
วัสดุและอุปกรณ์
• วัตถุดิบ:
ดอกอัญชันแห้ง (ควรแยกกลีบออกจากกลีบเลี้ยงสีเขียว เนื่องจากกลีบเลี้ยงมีคลอโรฟิลล์ซึ่งอาจปนเปื้อนสีได้)
• ตัวทำละลาย:
เอทานอลเกรดอาหาร- (เช่น 50-70% ในน้ำ) หรือน้ำที่มีความเป็นกรด (เช่น ที่มีกรดซิตริก 1% หรือ HCl 0.01%) การทำให้เป็นกรดช่วยให้แอนโทไซยานินคงตัวโดยคงรูปแบบไอออนบวกของฟลาวีเลียม (สีแดง)
• อุปกรณ์:
เครื่องชั่งเชิงวิเคราะห์ เครื่องบดหรือเครื่องปั่น ขวดรูปชมพู่หรือบีกเกอร์ เครื่องกวนแม่เหล็กพร้อมจานร้อน เทอร์โมมิเตอร์ ตะแกรงหรือกระดาษกรอง (Whatman No. 1) การตั้งค่าการกรองสูญญากาศ กระบอกตวง เครื่องระเหยแบบหมุน ขวดแก้วสีเหลืองอำพันสำหรับจัดเก็บ
ขั้นตอน
• การเตรียมตัวอย่าง:
ชั่งน้ำหนักดอกอัญชันแห้งตามจำนวนที่กำหนด (เช่น 50 กรัม) ใช้เครื่องบดบดดอกไม้ให้เป็นผงละเอียด ขนาดอนุภาคที่เล็กลงจะเพิ่มพื้นที่ผิว ส่งผลให้การสกัดมีประสิทธิภาพมากขึ้น
• การเตรียมตัวทำละลาย:
เตรียมตัวทำละลายสำหรับการสกัด ตัวอย่างเช่น เตรียมเอทานอล 60% (ปริมาตร/ปริมาตร) 500 มล. โดยผสมเอทานอล 100% 300 มล. กับน้ำกลั่น 200 มล. ทำให้ตัวทำละลายเป็นกรดโดยเติมกรดซิตริกให้มีความเข้มข้น 1% (w/v) ซึ่งหมายความว่าเติมกรดซิตริก 5 กรัมลงในตัวทำละลาย 500 มล.
• กระบวนการสกัด:
เทผงดอกไม้ลงในขวดรูปชมพู่ขนาด 1,000 มล.
เติมตัวทำละลายที่เตรียมไว้ลงในขวดโดยมีอัตราส่วนของแข็ง-ต่อ-ของเหลว 1:10
วางขวดไว้บนเครื่องคนแม่เหล็กพร้อมจานร้อน ตั้งอุณหภูมิเป็น 50 องศา และกวนด้วยความเร็วคงที่ตามระยะเวลาที่กำหนด โดยทั่วไปคือ 60-90 นาที ความร้อนเล็กน้อยและความปั่นป่วนช่วยเพิ่มประสิทธิภาพในการสกัดอย่างมีนัยสำคัญเมื่อเทียบกับการหมักแบบเย็น
ปิดขวดด้วยอลูมิเนียมฟอยล์เพื่อปกป้องแอนโทไซยานินที่ไวต่อแสง-จากการย่อยสลาย
• การกรอง:
หลังจากหมดเวลาสกัดแล้ว ให้นำขวดออกจากเตาแล้วปล่อยให้เย็น กรองส่วนผสมก่อนโดยใช้ผ้ามัสลินหรือตะแกรงเพื่อขจัดเศษซากพืชจำนวนมาก จากนั้น ทำการกรองครั้งที่สองผ่านกระดาษกรอง (หรือภายใต้สุญญากาศ) เพื่อให้ได้สารสกัดของเหลวสีน้ำเงินเข้มที่ใส
• ความเข้มข้น (ไม่บังคับแต่แนะนำ):
สารสกัดหยาบจะเจือจาง หากต้องการให้แอนโทไซยานินเข้มข้น ให้ใช้เครื่องระเหยแบบหมุน (rotovap) ตั้งอุณหภูมิอ่างน้ำเป็น 40-45 องศา (เพื่อหลีกเลี่ยงการเสื่อมสภาพจากความร้อน) และใช้สุญญากาศเพื่อลดจุดเดือดของตัวทำละลาย กระบวนการนี้จะระเหยเอธานอลและน้ำบางส่วนออกไป ส่งผลให้ได้สารสกัดเข้มข้นและมีความหนืด อีกทางหนึ่ง สำหรับสารสกัดที่เป็นน้ำ สามารถใช้การทำแห้งแบบเยือกแข็ง (ไลโอฟิไลเซชัน) เพื่อผลิตผงแห้งได้
• พื้นที่จัดเก็บ:
เก็บสารสกัดเข้มข้นขั้นสุดท้ายหรือผงดอกอัญชันไว้ในขวดแก้วสีเหลืองอำพัน แล้วล้างด้วยก๊าซไนโตรเจนถ้าเป็นไปได้ และเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 4 องศา แสง ออกซิเจน และความร้อนเป็นศัตรูหลักของความเสถียรของแอนโทไซยานิน
อะไรปัจจัยที่มีผลกระทบการสกัดแอนโทไซยานิน?
การสกัดสารแอนโทไซยานินจากดอกอัญชันได้รับอิทธิพลจากตัวแปรหลายประการ การปรับปัจจัยเหล่านี้ให้เหมาะสมเป็นสิ่งจำเป็นเพื่อให้ได้ผลผลิตสูงสุดและรักษาความคงตัวของเม็ดสี
การเลือกตัวทำละลาย
นี่คือปัจจัยที่สำคัญที่สุด ผงดอกอัญชันมีสารแอนโทไซยานินซึ่งเป็นโมเลกุลที่มีขั้วจึงจำเป็นต้องใช้ตัวทำละลายที่มีขั้ว
• น้ำ:
ตัวทำละลายที่ง่ายที่สุด ปลอดภัยที่สุด และถูกที่สุด เหมาะสำหรับการใช้งานด้านอาหาร อย่างไรก็ตาม น้ำสามารถ-ดึงน้ำตาล โปรตีน และสิ่งสกปรกที่ละลายน้ำได้อื่นๆ-ออกมาได้ ประสิทธิภาพการสกัดอาจต่ำ
• น้ำที่เป็นกรด:
การเติมกรดอ่อนจำนวนเล็กน้อย (เช่น กรดซิตริก กรดอะซิติก หรือกรดไฮโดรคลอริก) ลงในน้ำ (pH 1-3) จะทำให้โมเลกุลแอนโทไซยานินโปรตอน และทำให้เสถียรในรูปไอออนบวกของฟลาวิเลียม (ซึ่งมีสีแดงแต่ดูเสถียรกว่าในระหว่างการสกัด) และปรับปรุงความสามารถในการละลายและผลผลิต นี่เป็นวิธีปฏิบัติทั่วไปมาก
• เอทานอล-ส่วนผสมของน้ำ:
ส่วนผสมของเอธานอลและน้ำ (เช่น เอทานอล 50-80%) มักเป็นตัวทำละลายที่มีประสิทธิภาพมากที่สุด เอทานอลปลอดภัยสำหรับใช้เป็นอาหารและเครื่องสำอาง (สถานะ GRAS) และมีขั้วที่ดีสำหรับแอนโทไซยานิน น้ำช่วยให้เนื้อเยื่อพืชขยายตัวทำให้เอธานอลซึมผ่านได้ดีขึ้น เปอร์เซ็นต์เอทานอลที่สูงขึ้นอาจมีประสิทธิผลน้อยลงสำหรับเทอร์นาตินที่มีขั้วสูง
• ตัวทำละลายอื่นๆ:
เมทานอลมีประสิทธิภาพมากในห้องปฏิบัติการ แต่เป็นพิษและไม่เหมาะสำหรับสารสกัดเกรดอาหาร-

อัตราส่วนของแข็ง-ต่อ-ของเหลว
อัตราส่วนของมวลผงพืชต่อปริมาตรตัวทำละลายเป็นสิ่งสำคัญ อัตราส่วนที่สูงเกินไป (ผงมากเกินไป) จะทำให้ตัวทำละลายอิ่มตัว ซึ่งจำกัดการสกัดเพิ่มเติม อัตราส่วนที่ต่ำเกินไป (ตัวทำละลายมากเกินไป) ถือเป็นการสิ้นเปลือง อัตราส่วนที่เหมาะสมช่วยให้มั่นใจได้ถึงการใช้ตัวทำละลายและพลังงานอย่างมีประสิทธิภาพ อัตราส่วนที่ปรับให้เหมาะสมโดยทั่วไปมีตั้งแต่ 1:10 ถึง 1:50 (w/v)
อุณหภูมิ
ตามกฎทั่วไป การเพิ่มอุณหภูมิจะเพิ่มผลผลิตในการสกัดโดยการลดความหนืดของตัวทำละลายและเพิ่มอัตราการแพร่ อย่างไรก็ตาม แอนโทไซยานินสามารถทนต่อความร้อนได้ มีช่วงอุณหภูมิที่เหมาะสมที่สุด (ปกติคือ 40-70 องศาสำหรับ HAE และต่ำกว่าสำหรับ UAE/MAE) ซึ่งเกินกว่านั้นการย่อยสลายจะเกิดขึ้นเร็วกว่าการสกัด ส่งผลให้มีการสูญเสียแอนโทไซยานินสุทธิ
เวลา
เวลาในการสกัดต้องได้รับการปรับให้เหมาะสม ในตอนแรกผลผลิตจะเพิ่มขึ้นอย่างรวดเร็วเมื่อเวลาผ่านไปเนื่องจากแอนโทไซยานินแพร่กระจายออกไป อย่างไรก็ตาม เมื่อถึงจุดสมดุลแล้ว โดยที่ไม่มีการสกัดสารประกอบอีกต่อไป การสกัดเป็นเวลานานเกินกว่าจุดนี้จะไม่มีประสิทธิภาพ และอาจทำให้แอนโธไซยานินที่สกัดออกมาอยู่ในสภาวะที่เสื่อมโทรม (ออกซิเจน แสง ความร้อน)
ค่า pH
ตามที่กล่าวไว้ ค่า pH ต่ำ (สภาพแวดล้อมที่เป็นกรด) เอื้ออำนวยต่อความคงตัวของแอนโทไซยานินในระหว่างการสกัดอย่างมาก ค่า pH ที่เป็นกลางหรือเป็นด่างอาจทำให้สีเสื่อมลงอย่างรวดเร็วและสูญเสียสีได้
สรุป
การสกัดสารแอนโทไซยานินผงดอกอัญชันจากดอกอัญชันถือเป็นขั้นตอนสำคัญในการควบคุมคุณค่าของสารดังกล่าวในฐานะเม็ดสีธรรมชาติและสารประกอบออกฤทธิ์ทางชีวภาพ ตั้งแต่วิธีการใช้ตัวทำละลายแบบดั้งเดิมไปจนถึงเทคโนโลยีสีเขียวขั้นสูง สามารถปรับแต่งเทคนิคต่างๆ เพื่อเพิ่มผลผลิตสูงสุด รักษาเสถียรภาพ และตอบสนองความต้องการของอุตสาหกรรม วิธีทำให้บริสุทธิ์และวิเคราะห์ทำให้มั่นใจในคุณภาพของแอนโทไซยานินสำหรับใช้ในอาหาร อาหารเสริม เครื่องสำอาง และบรรจุภัณฑ์ที่เป็นนวัตกรรมใหม่ Guanjie Biotech คือผู้จำหน่ายผงดอกอัญชันจำนวนมาก ซึ่งรับประกันแหล่งวัตถุดิบคุณภาพสูง-ที่เชื่อถือได้สำหรับการสกัดแอนโทไซยานินและการใช้งานที่เกี่ยวข้อง ยินดีต้อนรับสู่สอบถามกับเราได้ที่info@gybiotech.com.
อ้างอิงs
(1) Khoo, HE, Azlan, A., Tang, ST, & Lim, SM (2017) แอนโทไซยานิดินและแอนโทไซยานิน: เม็ดสีที่เป็นอาหาร ส่วนผสมทางยา และประโยชน์ต่อสุขภาพที่อาจเกิดขึ้น การวิจัยด้านอาหารและโภชนาการ 61(1) 1361779
[2] Escher, GB, Wen, M., Zhang, L., Rosso, ND, & Granato, D. (2020) องค์ประกอบทางเคมีและคุณสมบัติออกฤทธิ์ทางชีวภาพของ Clitoria ternatea L.: ภาพรวม แนวโน้มด้านวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีการอาหาร, 102, 114–129
[3] Kong, JM, Chia, LS, Goh, NK, Chia, TF, & Brouillard, R. (2003) การวิเคราะห์และฤทธิ์ทางชีวภาพของแอนโทไซยานิน ไฟโตเคมี, 64(5), 923–933.
(4) Patras, A., Brunton, NP, O'Donnell, C., & Tiwari, BK (2010) ผลของการแปรรูปด้วยความร้อนต่อความคงตัวของแอนโทไซยานินในอาหาร: กลไกและจลนพลศาสตร์ของการย่อยสลาย แนวโน้มด้านวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีการอาหาร, 21(1), 3–11
[5] Srivastava, A. , Akoh, CC, Yi, W. , & Fischer, J. (2007) ผลของแอนโทไซยานินต่อคุณสมบัติทางเคมีกายภาพและความคงตัวของระบบอาหารต้นแบบ วารสารเคมีเกษตรและอาหาร, 55(22), 9020–9027.
[6] Yoshida, K., Mori, M., & Kondo, T. (2009) การพัฒนาสีของดอกไม้สีฟ้าโดยแอนโทไซยานิน: จากโครงสร้างทางเคมีไปจนถึงสรีรวิทยาของเซลล์ รายงานผลิตภัณฑ์จากธรรมชาติ, 26(7), 884–915.
[7] แนร์, วี, & มาซุมเดอร์, เอ. (2019) ตัวทำละลายยูเทคติกล้ำลึกตามธรรมชาติสำหรับการสกัดสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพ: บทวิจารณ์ วารสารโมเลกุลของเหลว, 296, 111928.
